一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br />1、了解透射電鏡、掃描電鏡各部件的名稱、結(jié)構(gòu)及性能;
2、了解透射及掃描電鏡的基本操作程序;
3、了解電鏡樣品制備的配套設(shè)備。
二、實(shí)驗(yàn)儀器及用品：
透射電鏡;掃描電鏡;小白鼠肝臟超薄切片;酵母菌或乳酸桿菌的負(fù)染樣品;噴好金膜的葉片及花粉樣品
三、方法步驟：
(一)透射電鏡操作規(guī)程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程，通過操作考試后才能正式上機(jī)操作。
2、操作程序
1)開機(jī)準(zhǔn)備
(1) 合上總電源閘刀，開啟電子交流穩(wěn)壓器，電壓指示應(yīng)為220V。開啟循環(huán)水，溫度指示應(yīng)為15-20℃。
(2) 開啟主機(jī)真空開關(guān)。
(3) 約20分鐘后，待高真空指示燈及照相室指示燈亮。
2)工作程序
(1)開啟主機(jī)電源開關(guān)，待熒光屏顯示操作數(shù)據(jù)后再進(jìn)行下一步。
(2)逐級(jí)加高壓致所需電壓，每加一級(jí)高壓，必須等高壓表中指示針停止擺動(dòng)才能加下一級(jí)。如指示針移出量程，必須從zui低移級(jí)加起。
(4) 根據(jù)說明書要求進(jìn)行合軸操作，使儀器處于*操作狀態(tài)。
(4)根據(jù)說明書的操作要求進(jìn)行觀察、換樣和拍照。
(5)作好實(shí)驗(yàn)記錄及儀器使用記錄。
3)關(guān)機(jī)程序
(1)關(guān)燈絲電流。
(2)關(guān)高壓。
(3)關(guān)主機(jī)電源開關(guān)。
(4)關(guān)真空開關(guān)。
(5) 20分鐘后，關(guān)循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關(guān)。
(6) 關(guān)閉總電源。
(二)掃描電鏡操作規(guī)程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規(guī)程，通過操作考試后才能正式上機(jī)操作。
2、操作程序
1)開機(jī)準(zhǔn)備
(1)合上總電源閘刀，開啟電子交流穩(wěn)壓器，電壓指示應(yīng)為220V。開啟冷卻循環(huán)水裝置電源開關(guān)。
(2)開啟試樣室真空開關(guān)(VACUUM POWER)，開啟試樣室準(zhǔn)備狀態(tài)開頭(STAND BY)。
(3)開啟控制柜電源開關(guān)(POWER).
(4)約20分鐘后，往試樣室液氮冷井中加入液氮。
2)工作程序
(1)開啟試樣室進(jìn)氣閥控制開關(guān)(CHAMB VENT)，將試樣放入試樣室后將試樣室進(jìn)氣閥控制開關(guān)(CHAMB VENT)關(guān)閉抽真空。
(2)開啟鏡筒真空隔閥。
(3)加高壓(ACCELERATION POTENTIAL)至25KV.
(4)加燈絲電流(FILAMENT)至7.5-8.
(5)調(diào)節(jié)顯示器對(duì)比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)至適當(dāng)位置.
(6)將圖象選區(qū)開關(guān)撥至全屏(FULL).
(7)調(diào)節(jié)聚焦旋鈕(MEDIUM)和(FINE)至圖象清晰。
(8)選擇適當(dāng)?shù)膾呙杷俾?SCAN RATE)觀察圖象。
(9)根據(jù)說明書的操作要求進(jìn)行觀察和拍照。
(10)作好實(shí)驗(yàn)記錄及儀器使用記錄。
3)關(guān)機(jī)程序
(1)關(guān)燈絲電流(FILAMENT)。
(2)關(guān)高壓(ACCELERATION POTENTIAL)。
(3)反時(shí)針調(diào)節(jié)顯示器對(duì)比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)到底.
(4)關(guān)閉鏡筒真空隔閥。
(5)關(guān)主機(jī)電源開關(guān)。
(6)關(guān)真空開關(guān)。
(7)20分鐘后，關(guān)循環(huán)水和電子交流穩(wěn)壓器開關(guān)。
(8)關(guān)閉總電源。
四、觀察結(jié)果：
1、小白鼠肝臟超薄切片：一般可見細(xì)胞膜、核膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、肌纖維等結(jié)構(gòu)。
2、酵母菌或乳酸桿菌的負(fù)染樣品：由于重金屬鹽在樣品周圍的堆積而使樣品顯示負(fù)的反差，從而襯托出樣品的形態(tài)和大小。酵母菌近球型，有時(shí)可見出芽生殖;乳酸桿菌為桿狀。
3、葉片在掃描電鏡下一般可見上表皮有各種紋飾，下表皮可見氣孔器形態(tài)
4、花粉在掃描電鏡下一般可見表面的萌發(fā)溝和紋飾。
觀察過程中尋找典型部位進(jìn)行拍照。